单克隆抗体定制服务
单克隆抗体促销
最快!最好!最优惠!
60天鼠单克隆抗体制备服务仅需20000元
京天成生物技术(北京)有限公司,作为单克隆抗体制备方面的专家,现在很荣幸的推出一项新的服务:60天制备高质量的鼠单克隆抗体!
您需要提供:
蛋白质≥0.5mg,浓度大于0.2mg/ml,纯度希望大于90%;或者 1mg KLH-偶联的多肽 (或者1mg多肽,偶联的费用另计)
做Western所需的膜。
实验大致流程:
第0天: 进行第一次免疫。
第1-10天: 加强免疫。
第14天: 尾血约0.1ml, ELISA测定血清滴度,通过电子邮件将实验结果发给客户。
第18天: 融合。
第36天: 克隆初筛。
第40天: 克隆复筛。
第45天: 顾客确认。
第55天: 细胞库建立。(每个项目只提供一株单抗,额外的每株¥3千)
第60天: 送出杂交瘤细胞。
我们承诺得到的单抗满足western blot的应用要求。
付款方式:
项目启动前预付50%;项目成功后在我们寄出杂交瘤细胞前再付剩余的50% 。
单克隆抗体标准服务
应用我们的技术优势,提供两种单克隆抗体服务类型:提供抗原实物与提供抗原DNA序列。在提供抗原实物时,可以在60天内制备给定抗原的单克隆抗体,在满足客户要求的条件下提供5株杂交瘤细胞和上清液。如果仅提供抗原DNA序列,可由我公司克隆并表达该抗原。同时,可以根据客户需求针对抗体提供其他的相关优化服务。
项目启动时,收取30%的首付
必需材料:
纯化的抗原蛋白或多肽0.5-1mg,纯度:蛋白抗原SDS-PAGE纯度≥80%,偶联多肽纯度≥75%,以及抗原的必要相关信息。
第一部市场价¥30000
第Ⅰ阶段动物免疫与细胞融合,7周
免疫接种程序免疫3只Balb/c小鼠
接种2周后用ELISA测定血清滴度。
分离小鼠脾细胞
将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,产生所需杂交瘤单克隆细胞
单克隆细胞培养上清液进行ELISA检测并提供给客户进行鉴定
第Ⅱ阶段杂交瘤单克隆细胞的扩展和交货,1周
选择1~5个最佳的细胞进行扩展和冷冻
每株单克隆细胞寄交5管冷冻细胞或1个75毫升培养瓶活细胞。
如需腹水可以提供(1500元/2-5mg抗体)。
单抗附件服务
单克隆抗体的免疫融合
应用我们的专利技术,可以将两个具有抗肿瘤确切疗效的抗生素药物连接到您提供的已纯化的单克隆抗体上。该抗肿瘤药剂可以连接在单克隆抗体而保持失活状态,在复合单抗与细胞表面的抗原结合并被内吞时药物可以释放并被激活。
1. 探索性研究
必需材料
3~5 mg 纯化的单克隆抗体
第 I 阶段药物-抗体免疫复合物的产生 询价
改变抗体缓冲液为融合缓冲液
激活抗体
将两个不同的药物以不同的摩尔比与抗体融合
纯化免疫融合物
过滤除菌保存
第 II 阶段体外生物鉴定 询价
于96孔板接种细胞,至少接种3个不同的细胞系
添加免疫融合物到细胞培养孔,分别采用不同的稀释度
于培养的第5天进行MTT实验
重复生物鉴定两次
2. 中等量生产
必需材料
5~10 mg 纯化的单克隆抗体
第 I 阶段药物-抗体免疫复合物的产生, 市场价20000元
改变抗体缓冲液为融合缓冲液
激活抗体
将两个不同的药物以不同的摩尔比与抗体融合
纯化免疫融合物
过滤除菌保存
第 II 阶段体外生物鉴定, 市场价58000元
于96孔板接种细胞,至少接种3个不同的细胞系
添加免疫融合物到细胞培养孔,分别采用不同的稀释度
于培养的第5天进行MTT实验
重复生物鉴定两次
产出2 mg 免疫融合物
第 III 阶段动物体内实验, 市场价160000元
在30只裸鼠中接种适当剂量的肿瘤细胞
当肿瘤体积达到10 mm时,将小鼠分成6组,每组5只,分别给与不同剂量的免疫融合物、裸抗体、未融合的药物和缓冲液进行治疗
治疗后的第3-4天,测量肿瘤体积
试验结束后解剖小鼠,取出肿瘤并承重
重复动物实验两次
单克隆抗体的分子克隆与嵌合
可以快速的克隆您提供杂交瘤表达的单克隆抗体的可变区域。被克隆出来的片段将被插入到含有人IgG1轻链与重链的哺乳细胞表达载体上。如果同时提供抗原,可以将载体转染至CHO-dhfr细胞中表达人/鼠嵌合单克隆抗体,应用ELISA技术验证该抗体的特异性。
必需材料:
1 T-75活细胞或者1管冻存细胞
第 I 阶段 克隆单抗的可变区域,2周 市场价18000元
•从杂交瘤中RNA
•反转录PCR
•应用我们特有的引物通过PCR方法克隆轻链和重链的可变区域
•将PCR产物连接到T-载体上
•测序5个不同的轻链和重链的克隆
•报告测序数据
第 II 阶段 嵌合 市场价58000元
•将克隆的片段插入到特定的表达载体,该载体含有人IgG1的恒定区
•应用PCR方法确认正确连接
•转染至CHO-dhfr细胞或NS0/1 细胞
•克隆转染阳性细胞并扩增
•收集培养液
•应用ELISA法检测抗体的特异性
•向客户提供该表达质粒
订购
发送订单前,我们建议您与我们的技术人员取得联系: 请参考联系方式, 或订购方式. 谢谢您的惠顾.
单抗的同位素标记、放射自显影和生物分布分析
在将抗体开发成药物前,最重要的是要了解它的生物学分布情况。我公司为客户提供125-I 或111-In标记抗体服务,同时,还有放射自显影和生物学分布的监测服务。
必需材料:
1 mg 的纯化抗体, 蛋白或者小分子药物,感兴趣的肿瘤细胞系
第 I 阶段放射性同位素标记、SPECT 放射自显影, 询价
在5只裸鼠体内分别接种肿瘤细胞以形成肿瘤
以Iodogen 法用5 mci 125-I标记 0.2 mg 的抗体
PD-10层析柱纯化同位素标记的抗体
纯化产物,确定标记效率、产物纯度和活性
ELISA法鉴定抗体对肿瘤细胞或纯化抗原的生物学活性
给2只带有肿瘤的裸鼠静脉注射同位素标记的抗体
使用SPECT显影,检测选择4个不同的时间点:注射后的第4、24、48和72小时
通过Email向客户报告结果
第 II 阶段同位素标记和生物分布, 询价
在25只裸鼠体内分别接种感兴趣的肿瘤细胞以形成肿瘤
以Iodogen 法用5 mci 125-I标记 0.2 mg 的抗体
PD-10层析柱纯化同位素标记的抗体
纯化产物,确定标记效率、产物纯度和活性
ELISA法鉴定抗体对肿瘤细胞或纯化抗原的生物学活性
给16只带有肿瘤的裸鼠静脉注射同位素标记的抗体
使用SPECT显影,检测选择4个不同的时间点:注射后的第4、24、48和72小时
通过Email向客户报告结果
第 III 阶段放射自显和药物代谢动力学, 询价
以Iodogen 法用5 mci 125-I标记 0.2 mg 的抗体
PD-10层析柱纯化同位素标记的抗体
纯化产物,确定标记效率、产物纯度和活性
ELISA法鉴定抗体对肿瘤细胞或纯化抗原的生物学活性
以给定剂量给5只Balb/c小鼠静脉注射混有未标记抗体的同位素标记抗体
分8个不同时间段(注射后0.5、1、2、4、8、24、48和72小时)采集小鼠血液
通过Email向客户报告结果
